成果概要： 目前，宫颈癌的发病在全球妇女癌症中仍然高居第二甚至首位，我国每年约有5万妇女死于宫颈癌。尽管HPV疫苗预防宫颈癌已成功上市，但不能治疗所致的癌前病变和宫颈癌。因此迫切需要开展治疗宫颈癌及癌前病变的药物。以单克隆抗体和小分子化合物为代表的分子制剂已成功上市用于肿瘤的分子靶向诊断和治疗，但仍然存在急待解决的问题：如耐药、组织渗透性、费用昂贵、毒副作用严重等。本项目的亲和体分子（affibody）具有高亲和力、高特异性和选择性，类似抗体；同时又具备分子量小、穿透性好、易于制备和稳定性好等特性，在肿瘤治疗、体内成像诊断和生物技术的应用等方面比抗体更具可行性和优势和应用前景。目前，全球已有43个不同靶点的affibody 分子报道（包括本项目组的报道），针对乳腺癌的HER-2 affibody 分子已经进入临床前期用于乳腺癌的分子成像诊断制剂。HPV E7是致宫颈癌的肿瘤原性蛋白，持续并稳定地在宫颈癌及其癌前病变组织中呈高表达，而在正常组织中不存在。因此是HPV相关肿瘤诊断和治疗研究中非常特异的理想靶抗原。本项目以HPV16 E7为靶蛋白，通过构建了噬菌体展示HPV16 E7结合多肽的随机组合文库，从该文库中筛选获得了 HPV16 E7结合亲和体（affibody）分子多肽，即Z384，并进行测序鉴定。进一步将HPV16E7特异性affibody分子（Z384）及其亲和体-PE毒素（Z384 affitoxin）分子通过原核表达、纯化并进行了功能检测, 并对其分子靶向宫颈癌的诊断和治疗作用特性进行了研究和评价。针对Z384我们已经完成了大量的前期实验和成药性评价：（1）利用宫颈癌荷瘤裸鼠模型，考察了静脉注射Z384靶向宫颈癌肿瘤组织的显著效果，具有快速结合、高度特异性和成像对比显著等分子靶向制剂特点；（2）利用宫颈癌荷瘤裸鼠模型，考察了静脉注射Z384、Z384 affitoxin治疗宫颈癌的显著效果；（3）考察了Z384、Z384 affitoxin的药代动力学和体内半衰期；（3）考察了Z384 affitoxin急性毒性实验研究，证实了其的安全性；（4）完成了Z384、Z384 affitoxin的小试蛋白纯化工艺研究，制备成本约100元/克，完善了其质量标准检测。这些前期研究为Z384、Z384 affitoxin的临床应用研究奠定了坚实的基础