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牦牛源Pm分离株OmpH基因功能和致病性研究

专利权人:青海大学

目前,Pm全基因组信息已经释放,但与免疫和毒力相关的基因仍不清楚。为此,本研究拟利用基因同源重组和负筛选技术,构建青藏高原牦牛Pm临床分离的强毒株P0910、标准菌株C47-8 及疫苗株C45-2 的OmpH 基因缺失株与互补株,并对其进行PCR鉴定和Western-blotting检测。同时对其生物学特性进行检测,结果表明其互补株可连续稳定遗传;亲本株生长速度较慢,缺失株和互补株则生长速度较快,说明OmpH明显影响了Pm 的生长;P0910ΔOmpH、C47-8ΔOmpH、C45-2ΔOmpH基因缺失株

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目前,Pm全基因组信息已经释放,但与免疫和毒力相关的基因仍不清楚。为此,本研究拟利用基因同源重组和负筛选技术,构建青藏高原牦牛Pm临床分离的强毒株P0910、标准菌株C47-8 及疫苗株C45-2 的OmpH 基因缺失株与互补株,并对其进行PCR鉴定和Western-blotting检测。同时对其生物学特性进行检测,结果表明其互补株可连续稳定遗传;亲本株生长速度较慢,缺失株和互补株则生长速度较快,说明OmpH明显影响了Pm 的生长;P0910ΔOmpH、C47-8ΔOmpH、C45-2ΔOmpH基因缺失株对小鼠的致死能力显著下降,说明OmpH可能是Pm 重要的毒力因子之一;OmpH基因缺失后,对Vero细胞的附着能力显著下降,说明OmpH可能是Pm 重要的毒力因子之一;OmpH基因缺失后,对Vero细胞的附着能力显著下降,说明OmpH基因在Pm侵入宿主并对宿主细胞进行黏附的过程中起着重要作用。生长速率、毒力、黏附侵袭及免疫原性)。研究成果可为后期高原牦牛Pm毒力基因OmpH 与其致病性的相关性及基因缺失株应用于疫苗的可行性,为探究青藏高原牦牛出血性败血症免疫失败的原因,研制免疫原性强且能区分人工免疫与野毒感染的新型基因工程疫苗奠定理论基础,具有较强的科学意义和实践指导意义。