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青海省藏羊EgAgB基因克隆表达及检测试剂盒的研究

专利权人:青海大学

克隆出藏羊源EgAgB8/2基因,经BLAST比对后同源性为98%-100%,构建了pET-EgAgB8/2载体,获得了EgAgB8/2蛋白,进行了生物信息学分析及结构和功能预测;用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,获得9株能稳定分泌抗EgAgB8/2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,筛选出1株性能优良的单抗用于抗体制备,抗体效价达到1:100000;建立了单抗夹心ELISA检测方法,检测结果表明与羊多头蚴病、羊细颈囊尾蚴病、羊肝片吸虫病阳性血清均无交叉反应,特异性100%,敏感性为95.3%,可用于包虫病的临

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克隆出藏羊源EgAgB8/2基因,经BLAST比对后同源性为98%-100%,构建了pET-EgAgB8/2载体,获得了EgAgB8/2蛋白,进行了生物信息学分析及结构和功能预测;用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,获得9株能稳定分泌抗EgAgB8/2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,筛选出1株性能优良的单抗用于抗体制备,抗体效价达到1:100000;建立了单抗夹心ELISA检测方法,检测结果表明与羊多头蚴病、羊细颈囊尾蚴病、羊肝片吸虫病阳性血清均无交叉反应,特异性100%,敏感性为95.3%,可用于包虫病的临床诊断和检测。