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多血清型鸭疫里氏杆菌病抗体诊断方法建立及应用

专利权人:南京农业大学

鸭疫里氏杆菌是一种重要的禽病病原,分为21个血清型。但一直缺乏一种广泛适用的抗体检测方法。经过Western-blot,以证明重组OmpA是否与RA多种血清型发生免疫学反应。通过诱导表达及纯化条件摸索,以确定适用于ELISA包被的重组OmpA抗原。方阵试验和重复性试验,以确定ELISA抗原的最佳包被浓度和被检测血清的反应浓度。结果表明表达蛋白,可以与1,2,6,10,11,13,14和17等多种RA主要流行血清型有良好的免疫反应性。证实用加入1%的乙醇的诱导培养基,有利于重组蛋白的可溶性表达。经方阵试验确

具体了解该成果信息,请致电:025-84395328

鸭疫里氏杆菌是一种重要的禽病病原,分为21个血清型。但一直缺乏一种广泛适用的抗体检测方法。经过Western-blot,以证明重组OmpA是否与RA多种血清型发生免疫学反应。通过诱导表达及纯化条件摸索,以确定适用于ELISA包被的重组OmpA抗原。方阵试验和重复性试验,以确定ELISA抗原的最佳包被浓度和被检测血清的反应浓度。结果表明表达蛋白,可以与1,2,6,10,11,13,14和17等多种RA主要流行血清型有良好的免疫反应性。证实用加入1%的乙醇的诱导培养基,有利于重组蛋白的可溶性表达。经方阵试验确定抗原的最佳包被浓度为8 µg/mL,待检血清的最佳稀释度为1:160;重复性良好。本实验建立的鸭疫里氏杆菌多种血清型间接ELISA检测方法特异性高、重复性好,可以用于免疫后抗体消长以及感染性抗体的检测。