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用于HPV分型的材料技术

专利权人:武汉大学

该发明在于提供一种用于HPV分型检测的方法,该方法是采用多重核酸扩增、核酸杂交以及碱性磷酸酶标记的链霉亲和素显色的方法,根据人乳头瘤病毒(HPV)的L1基因靶序列设计高度特异的biotin标记的引物和探针,取病变组织和局部组织粘液、分泌物,通过PCR反应,并在核酸芯片上进行反向斑点杂交,及将合成的短核苷酸片段固定在核酸芯片上,用标记的目的片段与之杂交。随后利用碱性磷酸酶标记的链霉亲和素(AP-SA),它的链霉亲合素部分可以特异性结合生物素标记的探针,另外碱性磷酸酶部分可以充当碱性磷酸酶的反应底物的催化剂而

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该发明在于提供一种用于HPV分型检测的方法,该方法是采用多重核酸扩增、核酸杂交以及碱性磷酸酶标记的链霉亲和素显色的方法,根据人乳头瘤病毒(HPV)的L1基因靶序列设计高度特异的biotin标记的引物和探针,取病变组织和局部组织粘液、分泌物,通过PCR反应,并在核酸芯片上进行反向斑点杂交,及将合成的短核苷酸片段固定在核酸芯片上,用标记的目的片段与之杂交。随后利用碱性磷酸酶标记的链霉亲和素(AP-SA),它的链霉亲合素部分可以特异性结合生物素标记的探针,另外碱性磷酸酶部分可以充当碱性磷酸酶的反应底物的催化剂而产生显色反应,通过PCR反应和AP-SA两步信号放大过程,可以灵敏地检测出宫颈口脱落细胞中的HPV的脱氧核糖核酸(DNA),这种方法能够使患者简便易行、无创伤、无痛苦地定期接受高危HPV病毒检测,从而能够使医生获取病人的第一手资料,帮助医生临床决策,如拟诊及诊疗方案等。该技术较正向斑点杂交和凝胶电泳印迹转移杂交具有快速、简便、高敏感性、特异性强的特点,而且对待检原始材料质量要求低尤其是基因分型、基因突变检测,病原体的检测等方面有其独特的优势。 用于体检筛查宫颈癌前病变、HPV病毒载量及分型,还是评估预防宫颈癌的重要手段,预防并减少宫颈癌的发生