该成果包括两项技术：轮状病毒的细胞培养技术和实时荧光定量PCR（qPCR）检测试剂盒。一、轮状病毒的细胞培养技术。 该项技术包括以下步骤：以10%小牛血清加高糖DMEM作为细胞生长液，将轮状病毒腹泻病人或动物粪便标本用1×PBS(0.1M)制成悬液，经50μg/mL胰酶在37℃下作用后接种于MA-104罗猴肾细胞，在37℃下吸附1h；以及加含胰酶（无血清）的DMEM细胞培养液，37℃培养3～4天，CPE达到90%时收获细胞培养液，冻融2次，作为下一代培养的接种物培养传代。该方法可适用于人或动物，通过对粪便标本的多次培养，效果可靠，重复性良好。 该成果已获得发明专利授权（ZL 201010563967.2）。 二、BRV实时荧光定量PCR（qPCR）检测试剂盒 根据Genbank牛轮状病毒VP4和VP7基因，分别设计了VP4 VP4和VP7基因的特异性引物，建立了EvaGreen荧光定量RT-PCR(qPCR)检测方法，研发出了实时荧光定量PCR（qPCR）检测试剂盒。检测试剂盒由VP7基因保守序列特异性引物、特异性荧光探针、逆转录酶、耐热DNA聚合酶（Taq酶）等成分组成，运用实时荧光定量PCR（qPCR）方法检测，样本稀释度达10-5～10-4，定量检测线性范围达10-1拷贝／μＬ，对其它病毒核酸、细菌和阴性对照无任何扩增，特异性强；以及包括样品的采集与处理、病毒RNA的提取、特异性引物的设计、RT-PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳等操作方法及结果判定，本试剂盒具有快速、敏感、特异的特点，降低了检测成本和时间，省时省力，可用于粪便和血液等多种样本中轮状病毒的定量检测,以及适用于 BVDV 的检测、诊断和流行病学调查。检测快速、敏感、特异，可在4个小时内获得结果。 经在甘肃省多地近万头（份）临床样本试用，大幅提高了该病的诊断准确率，明显减少了腹泻性疾病造成的经济损失。