本发明是一种以新鲜大蒜为原料制备和纯化大蒜多糖的一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法；本发明通过洗涤去杂，破碎浸提等步骤，得大蒜粗提液，经大孔树脂处理，洗脱得大蒜多糖粗提液，再经逆流色谱一步纯化得大蒜多糖精品。本方法实现了一步纯化制备高纯度大蒜多糖的理想；该方法采用逆流色谱技术纯化大蒜多糖不仅能够实现纯度高、操作简单、效率高、价格低，而且还优化了制备高纯度大蒜多糖的提取工艺，为规模分离纯化大蒜多糖精品提供技术支持，有很好的推广应用价值。