取自病人自身的间充质干细胞已被证明是治疗多种肝脏疾病的有效手段之一。针对现时该方法的几种不足之处,包括分化后单一肝细胞类型、注射细胞仅为2D细胞悬液、治疗效率低和移植后成瘤性等问题,国际上有少数报道指出可以通过3D支架的方式构建人工肝予以克服。本项目为解决以上问题,提出了首先将干细胞分化成四种肝脏主要细胞类型,然后再以正常生理条件比例混合种植于新型3D纳米支架材料令其完成组装的思路,在体外构建具完全肝功能且达到临床移植标准的人工3D肝脏。此外,原代干细胞的冰冻储存和肝脏组织的低温/超低温储存是临床再生医学应用的基础和关键技术。我们在传统的细胞慢冻法(添加10% DMSO)的基础上,对冷冻的干细胞解冻技术进行了优化和改进。相比传统方法,该方法复苏的细胞活性较高,对实验流程和操作步骤的要求更简捷。